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Dead Cell Debris and Impurities Removal Kit
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很多细胞实验中对单细胞悬液质量要求严苛，有核率是影响后续数据质量的关键因素。死细胞碎片杂质含量过高易致有核率低，可能引发有效细胞识别不准确、界限模糊、捕获细胞数异常及背景升高等问题。基于10,000+样本、150+组织类型单细胞测序经验，百奥益康自主研发死细胞碎片杂质去除试剂盒，能高效去除单细胞悬液中的死细胞碎片杂质，提升悬液质量，为单细胞测序、细胞培养或其他细胞相关检测实验提供有力支持。
产品优势
适用范围广：哺乳动物单细胞悬液中死细胞碎片杂质的快速高效去除。
性能表现好：快速、高效的去除单细胞悬液中的死细胞碎片杂质，大幅度改善单细胞悬液质量，从而获得高质量的数据结果。
应用场景多：适用于含有大量死细胞碎片杂质的细胞悬液优化，可应用于高通量单细胞测序、细胞培养或其他细胞相关检测相关科学研究实验。
实践经验丰富：基于超10,000个样本、150余种组织类型的解离经验开发，历经多年实验验证，技术成熟可靠。
测试效果
我们对新鲜的小鼠卵巢组织进行了实验，从细胞直径分布图可以看出，使用死细胞碎片杂质去除试剂盒处理后，悬液中 碎片杂质的分布明显减少，单细胞悬液的有核率参数明显提升，从46%提升至93%。从数据分析结果可以看出，处理之后，测得的基因中位数明显改善从814提升至3,253。
测试流程：
测试结果：
利用死细胞碎片杂质去除试剂盒处理单细胞悬液前后样本质检结果
使用死细胞碎片杂质去除试剂盒处理单细胞悬液前后样本细胞直径分布
使用死细胞碎片杂质去除试剂盒处理单细胞悬液前后样本测序数据结果
产品宣传页
点击下载：百奥益康死细胞碎片杂质去除试剂盒产品宣传页（货号：BA3339）
产品说明书
点击下载：百奥益康死细胞碎片杂质去除试剂盒使用说明书 （货号：BA3339）
订购信息
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产品名称
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产品货号 | 产品规格 | 目录价格 |
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死细胞碎片杂质去除试剂盒
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BA3339-10
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10 rxns | ¥3,699 |
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BA3339-50
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50 rxns | ¥12,655 |
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产品 FAQ
1. Q：按步骤将 2mL 混合液（细胞悬液 + DRS①）铺在 2mL DRS②上层时，混合液快速渗入 DRS②中，两层逐渐融合，无法形成稳定分层，是什么原因导致的？该如何避免渗层？
A：渗层多因 DRS①与 DRS②密度差未稳定形成，或混合液含大量小分子杂质。避免方法：①使用前将 DRS①和 DRS②在 4℃冰箱静置 30 分钟，确保试剂密度均匀；②铺层前将混合液通过 20μm 细胞筛过滤 1 次，去除＜20μm 的破碎细胞器等杂质；③铺层时用 1mL 低吸附枪头沿管壁缓慢滴加混合液，每滴间隔 2 秒，待前一滴完全扩散至 DRS②表面后再滴加下一滴，可使分层稳定性提升至 90%。
2. Q：离心后仅观察到 3 层溶液（细胞碎片层、白膜层、沉淀层），缺失 DRS①与 DRS②的过渡层，且白膜层中死细胞占比达 30%，是什么原因导致分层缺失？该如何调整操作？
A：分层缺失多因离心机加速度 / 减速度过高，破坏试剂界面。调整方法：①严格将离心机加速度、减速度设为 “居中” 档位（如数字离心机设为 “5”），避免高速升降速冲击分层；②离心前在 2mL DRS②上层轻轻滴加 100μL 含 2% FBS 的 PBS，形成缓冲层；③补加 0.5mL DRS①至混合液中，重新按步骤铺层离心，可使 4 层结构清晰呈现，白膜层死细胞占比降至 15% 以下。
3. Q：处理肿瘤组织单细胞悬液（死细胞率＞40%，含大量坏死碎片）时，离心后细胞碎片层厚度达 1.5mL，完全覆盖白膜层，无法定位活细胞层，该如何准确找到并吸取白膜层？
A：碎片层过厚需通过 “分步吸除 + 显微观察” 定位。操作方法：①用 1mL 低吸附枪头缓慢吸除上层细胞碎片层，每吸除 200μL 后，取 10μL 液体在显微镜下观察，当视野中出现均匀分布的圆形活细胞时停止吸除；②此时液面下 2-3mm 处即为白膜层，用枪头沿管壁插入该区域，缓慢吸取 800μL 液体；③若吸取液体仍含少量碎片，可再次通过 20μm 细胞筛过滤，活细胞纯度可达 90% 以上。
4. Q：步骤 6 用含 5% FBS 的 PBS 稀释至 10mL 后，4℃、450×g 离心 5 分钟，白膜层细胞沉淀呈 “松散絮状”，弃上清时约 25% 细胞随上清流失，该如何获得致密沉淀？
A：沉淀松散因活细胞表面带负电荷，相互排斥难以聚集。解决方法：①将离心转速提高至 500×g，离心时间延长至 8 分钟；②稀释时在 10mL PBS 中加入 30μL 1% 多聚赖氨酸（自备，无细胞毒性），中和细胞表面电荷；③离心后保留 150μL 上清，用枪头轻轻吹打使沉淀与上清混合，避免小体积细胞流失，可使沉淀致密性提升 65%，细胞损失率降至 10% 以下。
5. Q：试剂盒开封后，DRS①在 4℃避光保存 13 个月，使用时发现白膜层体积从 800μL 缩减至 300μL，死细胞去除率从 90% 降至 60%，是试剂失效了吗？该如何快速验证？
A：DRS①4℃有效期为 1 年，超期后密度调节成分易降解。验证方法：①取 1mL DRS①与 1mL 含 2% FBS 的 RPMI 1640 混合，铺在 2mL DRS②上层，按说明书参数（4℃、1400×g）离心 20 分钟；②若离心后白膜层体积＜500μL，且显微镜下死细胞占比＞25%，说明 DRS①失效；③若仍有部分效果，将 DRS①用量增加至 1.5mL（常规 1mL），可使白膜层体积恢复至 600μL，勉强用于基础实验（不建议单细胞测序）。
6. Q：处理含大量红细胞的脾脏单细胞悬液时，离心后白膜层与红细胞层（介于碎片层与白膜层之间）界限模糊，吸取时易混入红细胞，该如何区分并分离两层？
A：界限模糊因红细胞密度与活细胞接近，易随活细胞聚集。区分方法：①离心后将离心管置于冰上静置 10 分钟，红细胞因密度略高会缓慢沉降，与白膜层形成清晰界面；②用 100μL 低吸附枪头吸取少量液体，显微镜下观察，若以圆形活细胞为主（无双凹形红细胞），即为白膜层；③吸取时沿界面下方 2mm 处开始，仅吸取 600-800μL 液体，可使红细胞混入率降至 10% 以下。
7. Q：步骤 2 用含 2% FBS 的 RPMI 1640 重悬细胞沉淀时，细胞易黏附在离心管内壁，导致后续混合液中细胞浓度不足，该如何避免细胞贴壁？
A：细胞贴壁多因离心管未做防黏处理。避免方法：①使用前将离心管浸泡在含 2% FBS 的 RPMI 1640 中 5 分钟，取出沥干（无需冲洗），在管壁形成防黏涂层；②重悬时用低吸附枪头沿管壁轻轻吹打，避免细胞直接撞击管壁；③若已贴壁，用无菌细胞刮轻轻刮擦管壁，收集黏附细胞，可使细胞回收率提升至 85% 以上。
8. Q：按说明书用 DMEM 培养基替代 RPMI 1640 重悬细胞，离心后发现白膜层偏移至沉淀层上方，活细胞回收率仅 50%，是什么原因导致的？该如何调整 DMEM 的使用方法？
A：DMEM 密度高于 RPMI 1640，导致混合液密度异常，影响分层。调整方法：①使用无血清 DMEM 替代含血清 DMEM，降低培养基整体密度；②重悬时将细胞浓度从常规 1×10⁶ cells/mL 提高至 2×10⁶ cells/mL，补偿密度差异；③离心时将转速从 1400×g 降至 1350×g，避免密度过高导致活细胞沉降，可使活细胞回收率恢复至 80% 左右。
9. Q：步骤 5 吸取白膜层时，不小心吸入少量沉淀（含杂质与死细胞），导致细胞悬液中出现黑色颗粒，该如何去除这些颗粒且不损失活细胞？
A：吸入的沉淀颗粒需通过 “梯度清洗” 去除。操作方法：①将吸取的白膜层液体加入 5mL 含 5% FBS 的 PBS，轻轻混匀；②4℃、200×g 离心 3 分钟，此时杂质与死细胞颗粒会沉降至管底，弃上层 4mL 液体；③重复清洗 2 次，最后用 2mL 含 5% FBS 的 PBS 重悬，可去除 95% 以上黑色颗粒，活细胞损失率＜5%。
10. Q：离心后发现白膜层呈 “碎片化分布”（非连续带状），活细胞分散在不同层中，回收率仅 40%，是什么原因导致的？该如何避免白膜层碎片化？
A：白膜层碎片化多因铺层时混合液未沿管壁均匀扩散，局部浓度过高。避免方法：①铺层前将 15mL 离心管倾斜 45°，让混合液沿倾斜管壁缓慢流下，自然扩散成均匀薄层；②若混合液黏度高（如含大量黏附细胞），可先加入 50μL DRS①稀释，再进行铺层；③离心后轻拿离心管，避免震动导致白膜层断裂，可使白膜层连续性提升至 85%，回收率恢复至 75% 以上。