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Anti Clumping Agent
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高通量单细胞测序对单细胞悬液质量要求很高，包括细胞活性、有核率、结团率等参数，单细胞悬液的结团率是影响后续油包水实验是否成功的重要因素，较高的结团率可能引起油包水过程发生堵塞，导致最终捕获的细胞数过低等不利现象。
百奥益康团队累积了10,000+个样本的单细胞测序服务经验，涉及150+种不同类型的组织，具有丰富的新鲜组织解离的经验。在此基础上，百奥益康自主研发了抗细胞结团剂，利用该试剂，可高效的降低单细胞悬液中的结团率，提高悬液质量。
产品优势
适用范围：适用于易发生细胞结团的单细胞悬液，可降低其结团率。
性能表现：可快速、高效的降低单细胞悬液中的结团率，大幅度改善单细胞悬液质量，从而获得该高质量的数据结果。
应用场景：适用于易发生细胞结团的单细胞悬液优化，可应用于高通量单细胞测序、细胞培养或其他细胞相关检测相关科学研究实验。
实践经验丰：基于超过10,000个样本、150余种组织类型的组织解离经验开发而成，历经多年实验验证。
测试效果
我们对新鲜的小鼠胃组织进行了实验，从镜检图可以看出，使用抗细胞结团剂处理后，悬液中结团的细胞分布明显减少，同时单细胞悬液的结团率参数明显下降，从28.67%降低至5.91%。从数据分析结果可以看出，处理之后，测得的基因中位数明显改善，从684提升至2162。
测试流程：
测试结果：
利用抗细胞结团剂单细胞悬液前后样本质检结果
使用抗细胞结团剂处理单细胞悬液前后镜检图
使用抗细胞结团剂处理单细胞悬液前后样本测序数据结果
产品宣传页
点击下载：百奥益康抗细胞结团剂产品宣传页（货号：BA3345）
产品说明书
点击下载：百奥益康抗细胞结团剂使用说明书（货号：BA3345）
订购信息
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产品名称
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产品货号 | 产品规格 | 目录价格 |
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抗细胞结团剂
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BA3345-100
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100 mL | ¥1,500 |
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BA3345-500
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500 mL | ¥6,000 |
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产品 FAQ
1. Q：处理结团率超 40% 的肿瘤单细胞悬液时，按步骤用 1mL 抗细胞结团试剂（含 3% FBS）重悬，30℃水浴 20 分钟后，结团率仅降至 25%（预期≤10%），是什么原因导致效果不佳？该如何优化操作？
A：肿瘤细胞因表面黏附分子丰富，常规处理易残留结团。优化方法：①将抗细胞结团试剂中 FBS 终浓度提高至 5%（常规 3%），增强试剂对黏附分子的中和能力；②水浴孵育时间延长至 30 分钟，期间每 10 分钟吹打 1 次（常规 2 次），促进试剂渗透；③重悬时用 1mL 低吸附枪头反复吹打 25 次，分散初始结团，可使结团率降至 10% 以下，满足下游实验需求。
2. Q：按要求配制含 3% FBS 的抗细胞结团试剂时，发现 FBS 与试剂混合后出现 “轻微分层”，并非均匀溶液，担心影响抗结团效果，该如何确保试剂与 FBS 充分混匀？
A：分层多因 FBS 未缓慢加入或试剂未提前复温。解决方法：①试剂使用前从 4℃取出，室温静置 15 分钟（避免低温导致 FBS 析出）；②加入 FBS 时，按 “每 10mL 试剂加入 0.3mL FBS” 的比例，边加边用 1mL 低吸附枪头吹打 15 次；③配制后颠倒离心管 8 次（避免剧烈振荡产生气泡），可使溶液均匀度达 95%，无分层现象，不影响抗结团效果。
3. Q：步骤 2 重悬细胞时，发现细胞浓度达 3000 个 /μL（超推荐上限 2000 个 /μL），若直接稀释会导致试剂浓度不足，该如何调整操作以适配高浓度细胞悬液？
A：高浓度细胞易因接触过密加剧结团，需等比例调整试剂用量。操作方法：①按 “细胞浓度 2000 个 /μL 对应 1mL 试剂” 的比例，计算所需试剂体积（如 3000 个 /μL 细胞需 1.5mL 试剂）；②补加 0.5mL 抗细胞结团试剂（含 3% FBS），确保细胞浓度降至 2000 个 /μL 以下；③重悬后分 2 次吹打（每次 15 次），避免细胞沉底聚集，可使抗结团效率维持在 80% 以上。
4. Q：步骤 3 水浴孵育时，水浴锅温度波动至 35℃，孵育 20 分钟后质检发现细胞活性从 90% 降至 65%，是温度过高导致的吗？该如何挽救受损细胞并降低结团率？
A：35℃会破坏细胞膜完整性，导致活性下降。挽救方法：①立即将细胞悬液转移至冰上静置 10 分钟，降低细胞代谢损伤；②向悬液中加入 50μL 1% BSA（自备），增强细胞保护；③补加 0.5mL 含 3% FBS 的抗细胞结团试剂，30℃水浴补孵 10 分钟，可使细胞活性恢复至 75%，结团率降至 15% 左右（适用于基础实验）。
5. Q：试剂盒开封后，试剂在 4℃避光保存 14 个月，使用时发现抗结团率从 90% 降至 55%，是试剂失效了吗？该如何快速验证试剂有效性？
A：试剂 4℃有效期为 1 年，超期后抗结团活性成分易降解。验证方法：①取 100μL 试剂（含 3% FBS）与 100μL 含 1×10⁵个 HeLa 细胞（结团率已知 30%）的悬液混合，按常规步骤处理；②若处理后结团率＞20% 且细胞形态异常，说明试剂失效；③若结团率在 15%-20% 之间，可将试剂用量增加 1.2 倍，水浴时间延长至 25 分钟，抗结团率可提升至 70%，可用于细胞培养（不建议单细胞测序）。
6. Q：处理神经干细胞悬液（易结团且对机械力敏感）时，按步骤吹打后仍有大量小团块（直径＞30μm），且细胞活性下降至 70%，该如何在减少机械损伤的同时降低结团率？
A：神经干细胞脆弱，需优化吹打方式。解决方法：①使用 1mL 低吸附枪头，采用 “轻柔吸吹” 模式（吸液速度是常规的 1/2），每次吹打间隔 5 秒；②水浴孵育期间，用移液器缓慢颠倒离心管 3 次（替代吹打），避免机械冲击；③孵育后通过 20μm 细胞筛过滤 1 次，截留大团块，可使单细胞比例提升至 85%，活性维持在 80% 以上。
7. Q：步骤 5 离心（4℃、300×g、5 分钟）后，细胞沉淀松散呈 “絮状”，弃上清时约 20% 细胞随上清流失，该如何获得致密沉淀？
A：沉淀松散因抗结团试剂含分散成分，抑制细胞聚集。解决方法：①将离心转速提高至 350×g，离心时间延长至 8 分钟；②步骤 4 加入含 5% FBS 的 PBS 时，同时加入 30μL 1% 多聚赖氨酸（自备，无细胞毒性），中和细胞表面负电荷；③离心后保留 100μL 上清与沉淀混合，避免小体积细胞流失，可使沉淀致密性提升 60%，细胞损失率降至 8% 以下。
8. Q：处理含红细胞的脾脏单细胞悬液时，抗结团处理后裂红，发现裂红液与抗细胞结团试剂反应产生 “白色沉淀”，干扰细胞计数，该如何避免沉淀产生？
A：沉淀多因抗结团试剂中 FBS 与裂红液成分反应。避免方法：①抗结团处理后，先 4℃、300×g 离心 5 分钟，弃上清（去除多余试剂）；②用 4mL 含 5% FBS 的 PBS 重悬沉淀，再加入红细胞裂解液（BA3311）；③裂红后立即离心，可减少沉淀产生，细胞悬液澄清度提升 90%，不影响计数准确性。
9. Q：步骤 8 用含 5% FBS 的 PBS 重悬细胞时，发现细胞悬液放置 10 分钟后重新结团（结团率从 10% 升至 25%），是什么原因导致的？该如何维持单细胞状态？
A：重悬后结团多因抗结团试剂作用时效有限，或 PBS 中 FBS 浓度不足。解决方法：①重悬时在 PBS 中加入 10μL 抗结团试剂（含 3% FBS），延长抗结团效果；②将 FBS 浓度提高至 8%（常规 5%），增强细胞分散性；③重悬后每 5 分钟轻轻摇晃 1 次，避免细胞沉底聚集，可使单细胞状态维持 30 分钟以上，满足后续实验需求。
10. Q：按步骤处理后，细胞悬液中仍有少量 “纤维状杂质”（非细胞结团），干扰流式分析，该如何在不影响细胞活性的前提下去除杂质？
A：纤维状杂质多为组织解离残留的胶原成分。去除方法：①重悬后将细胞悬液通过 20μm 细胞筛过滤 1 次，杂质会被截留；②过滤时用 1mL 含 5% FBS 的 PBS 冲洗筛网，合并冲洗液；③若仍有微量杂质，加入 50μL 0.1% DNase I（自备），37℃孵育 5 分钟，降解核酸类杂质，可使细胞悬液纯度提升至 95%，不影响流式分析结果。