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Red Blood Cell Lysis Solution
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高通量单细胞测序对单细胞悬液质量要求很高，除了细胞活性等参数外，单细胞悬液的有核率是影响后续数据质量的重要因素，较低的有核率可能引起有效细胞识别不准确、有效细胞及非细胞界限模糊、捕获细胞数过高或过低，背景升高等不利现象。红细胞含量过多是造成有核率低的重要原因之一。
百奥益康团队累积了10,000+个样本的单细胞测序服务经验，涉及150+种不同类型的组织，具有丰富的新鲜组织解离的经验。在此基础上，百奥益康自主研发了红细胞裂解液，利用该裂解液，可高效的裂解单细胞悬液中的红细胞，提高悬液质量。
产品优势
适用范围广：哺乳动物细胞悬液中红细胞的快速高效裂解。
性能表现好：可快速、高效的裂解单细胞悬液中的红细胞，同时几乎不伤害其他淋巴细胞或其他有核的细胞，大幅度改善单细胞悬液质量，从而获得更高质量的数据结果。
应用场景多：适用于含有大量红细胞的细胞悬液优化，可应用于高通量单细胞测序等相关科学研究实验。
实践经验丰富：基于超10,000个样本、150余种组织类型的解离经验开发，历经多年实验验证，技术成熟可靠。
测试效果
我们对新鲜的人PBMC进行了实验，从细胞直径分布图可以看出，红细胞裂解处理后，红细胞的分布明显减少，单细胞悬液的有核率参数也从32.4%提升至92.6%，并且活性也得到明显改善。从数据分析结果可以看出，红细胞裂解处理后，测得的基因中位数明显改善，从497提升至1,666。
测试流程：
测试结果：
人PBMC样本经过红细胞裂解液处理前后样本质检结果对比
人PBMC样本经过红细胞裂解液处理前后样本细胞直径分布
人PBMC样本经过红细胞裂解液处理前后样本测序数据结果对比
注：以上数据均经对应项目的客户同意后发布。
产品宣传页
点击下载：百奥益康红细胞裂解液产品宣传页（货号：BA3311）
产品说明书
点击下载：百奥益康红细胞裂解液使用说明书（货号：BA3311）
订购信息
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产品名称
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产品货号 | 产品规格 | 目录价格 |
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红细胞裂解液
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BA3311-100
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100 mL | ¥150 |
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BA3311-500
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500 mL | ¥600 |
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产品 FAQ
1. Q：这款裂解液仅适用于血管组织解离后的红细胞去除吗？对其他来源样本（如血液、脾脏、肿瘤组织）中的红细胞是否有效？能否用于非哺乳动物样本（如禽类血液）？
A：裂解液适用于多种来源样本的红细胞去除，包括血管组织解离悬液、外周血、脾脏研磨悬液、肿瘤组织解离液等，核心通过渗透压差异破裂红细胞，通用性较强。但不适用于非哺乳动物样本，禽类等非哺乳动物红细胞有细胞核，细胞膜结构与哺乳动物差异大，本裂解液无法有效破裂其细胞膜，需使用专用禽类红细胞裂解液。对哺乳动物不同来源样本，仅需根据红细胞含量调整裂解时间，无需改变其他操作。
2. Q：说明书要求单细胞悬液与裂解液按 1:3 比例混合，若样本红细胞含量极少（如纯化后的内皮细胞悬液）或极多（如全血样本），比例是否需要调整？调整后裂解时间需同步变化吗？
A：需根据红细胞含量灵活调整比例：①红细胞极少时（如内皮细胞悬液，红细胞占比＜5%），可将比例调整为 1:1（1mL 悬液 + 1mL 裂解液），避免裂解液过量损伤目标细胞，裂解时间缩短至 1-3 分钟；②红细胞极多时（如全血样本），需将比例提升至 1:5（1mL 全血 + 5mL 裂解液），确保红细胞充分接触裂解液，裂解时间延长至 10-15 分钟，且每 3 分钟吹打一次，避免红细胞裂解不彻底。调整比例后，需同步适配裂解时间，核心判断标准为溶液清亮透明即停止裂解。
3. Q：步骤 3 要求 “湿冰上裂红”，湿冰与普通冰有什么区别？若用普通冰（非湿冰）或室温裂红，会对实验结果产生什么影响？
A：湿冰是指冰块与少量水混合的状态，能让离心管均匀接触低温环境，维持稳定的 4℃左右裂解温度；普通冰（干冰或块状冰）易导致离心管局部温度过低或不均，影响裂解效果。若用普通冰裂红，可能出现局部红细胞裂解过度、局部未裂解的情况，导致裂解不彻底；若室温裂红（25-30℃），裂解液活性会显著增强，不仅会快速破裂红细胞，还会损伤目标细胞（如血管内皮细胞、免疫细胞），导致目标细胞活性下降 30% 以上，严重时甚至全部死亡，必须严格在湿冰条件下操作。
4. Q：步骤 4 终止裂红需 “加入等体积的含 5% FBS 的 PBS”，“等体积” 是相对于单细胞悬液体积还是裂解后混合液体积？若用不含 FBS 的 PBS 终止，会有什么后果？
A：“等体积” 是相对于裂解后混合液体积（悬液 + 裂解液），例如 1mL 悬液 + 3mL 裂解液，混合液共 4mL，需加入 4mL 含 5% FBS 的 PBS 终止。若用不含 FBS 的 PBS 终止，无法中和残留裂解液的活性，残留裂解液会继续作用于目标细胞，破坏细胞膜结构，导致后续离心后细胞活性降低 25%-40%，且细胞易出现碎片；FBS 中的蛋白成分能快速封闭裂解液的作用位点，同时为细胞提供保护，是终止裂红的关键成分，不可省略。
5. Q：离心参数要求 “4℃，450×g 离心 5 分钟”，若实验室只有垂直离心机或离心参数设置错误（如转速过高 / 过低），会有什么影响？能否用室温离心替代 4℃离心？
A：垂直离心机无法替代水平离心机，垂直离心机的离心力方向与离心管垂直，会导致细胞沉淀不均匀，易出现沉淀松散或贴壁，弃上清时易吸走目标细胞；水平离心机能让细胞均匀沉淀在管底，便于后续操作。参数错误的影响：①转速过高（如 800×g）会导致细胞沉淀被压实，后续重悬困难，且可能压碎脆弱细胞（如淋巴细胞）；②转速过低（如 200×g）会导致细胞无法充分沉淀，随上清流失，得率降低。室温离心不可替代 4℃离心，室温会加速细胞代谢，且残留裂解液在室温下活性更高，进一步损伤细胞，建议严格遵循 4℃离心条件。
6. Q：步骤 6 和 7 要求 “共清洗两次”，若省略一次清洗，仅清洗一次，会对后续实验产生什么影响？清洗时用 RPMI 1640 培养基替代含 5% FBS 的 PBS 是否可行？
A：省略一次清洗会导致残留裂解液和红细胞碎片无法彻底去除：①残留裂解液会干扰后续实验（如单细胞测序的细胞捕获、流式细胞术的荧光信号检测），导致数据偏差；②红细胞碎片过多会影响细胞计数准确性，甚至堵塞检测仪器（如细胞计数仪的检测通道）。清洗时可用 RPMI 1640 培养基替代含 5% FBS 的 PBS，两种液体均能起到冲洗残留杂质的作用，且 RPMI 1640 培养基还能为细胞提供营养，但需确保培养基不含抗生素等可能影响后续实验的成分，若后续实验为蛋白提取，两种液体均可使用；若为细胞培养，建议优先选择含 5% FBS 的 PBS，能更好维持细胞状态。
7. Q：裂解后溶液未达到 “清亮透明”，仍有浑浊或红色沉淀，可能是什么原因导致的？该如何处理？
A：未清亮透明的常见原因及处理方法：①裂解时间不足，红细胞未完全破裂，需补加少量裂解液（按原比例的 1/3），继续湿冰孵育 3-5 分钟，期间每 2 分钟吹打一次，直至溶液清亮；②样本中杂质过多（如组织碎片、纤维成分），导致浑浊，需先通过 70μm 细胞筛过滤去除杂质，再观察溶液状态；③裂解液未充分混匀，部分区域裂解液浓度不足，需轻轻吹打混合液 10-15 次，确保裂解液均匀分布，若仍无改善，可补加等量裂解液延长孵育时间。
8. Q：产品需 “4℃避光保存”，若运输过程中冰袋融化，在室温（25℃）放置了 1 小时，还能继续使用吗？长期在室温下保存会有什么后果？
A：室温放置 1 小时可继续使用，但需立即放回 4℃冰箱，且使用前需充分混匀 —— 裂解液的渗透压平衡体系在室温短期放置（≤1 小时）内基本稳定，活性损失≤5%，不影响裂解效果。若长期在室温下保存（超过 24 小时），会导致裂解液中的盐离子浓度发生变化，渗透压失衡，不仅无法有效破裂红细胞，还可能导致目标细胞脱水或吸水膨胀，同时易滋生微生物（虽为无菌产品，但室温下微生物易繁殖），导致样本污染，因此必须严格在 4℃避光条件下保存，且避免反复取出室温放置。
9. Q：步骤 8 要求 “尽量少量的含 5% FBS 的 PBS 重悬”，具体用量该如何确定？若重悬体积过大导致细胞浓度过低，后续该如何浓缩？
A：重悬体积需根据后续实验需求确定：①若用于流式细胞术或单细胞测序，建议按 1×10⁶-1×10⁷ cells/mL 的浓度重悬，例如沉淀约含 1×10⁷个细胞，用 1-2mL PBS 重悬；②若用于蛋白提取，可根据提取试剂盒的要求调整，通常 50-100μL 即可。若重悬体积过大导致浓度过低，可通过 4℃、450×g 离心 5 分钟，弃部分上清，再用少量 PBS 重新调整浓度，离心过程中需注意轻柔操作，避免细胞损伤，浓缩次数不建议超过 2 次，以免影响细胞活性。
10. Q：与其他品牌的红细胞裂解液相比，本产品标注 “温和去除”，具体体现在哪些方面？对敏感细胞（如造血干细胞、神经细胞）的损伤率大概是多少？
A：“温和去除” 主要体现在两点：①渗透压梯度设计温和，仅针对红细胞的细胞膜特性（对渗透压敏感），对目标细胞的细胞膜损伤极小；②无需添加蛋白酶等刺激性成分，避免对细胞表面蛋白和内部结构造成破坏。对敏感细胞的损伤率较低：实验数据显示，用本产品处理造血干细胞悬液后，细胞活性维持在 85% 以上，损伤率＜15%；处理神经细胞悬液时，活性维持在 80% 以上，损伤率＜20%，显著低于普通裂解液（普通裂解液对敏感细胞的损伤率通常＞30%）。若用于敏感细胞实验，建议将裂解时间控制在 1-5 分钟，减少细胞与裂解液的接触时间，进一步降低损伤率。