百奥益康动物组织冻存液

Animal Tissue Freezing Medium

(货号:BA3312)

 

 

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百奥益康动物组织冻存液能快速便捷地进行实体组织的冻存,可实现长期低温保存,维持样本初始状态,复苏后细胞活性恢复良好,提高实验安排的灵活性。该冻存液已获“国家发明专利证书”。数据显示,动物组织样本在-80℃下至少能保存1年,液氮中可保存数年,复苏后制备的单细胞悬液各项参数出色,为后续实验提供有力支持。

 

 

 

 

 

产品优势

 

 

 

广泛应用:广泛应用于人和动物组织的高通量单细胞测序等需维持细胞活性的科研实验。

 


场景多样:实验时间未定或需长距离运输时,可解决离体组织样本采集后的保存与运输难题。 

 


高效冻存:本冻存液提供一种简单安全有效的冻存离体动物组织方法,较好保持组织细胞活性。

 

 

性能优异:组织冻存后复苏解离出的悬液质量优异,小鼠脾脏、肾脏组织冻存1年后活性均超90%。

 

 

长期保存:动物组织样本在-80℃下至少能保存1年,液氮中可保存数年,满足长期存储需求。 

 

 

专利产品:该冻存液荣获“国家发明专利证书”,充分彰显了产品质量与效果的卓越性。

 

 

 

 

测试效果

 

 

 

对新鲜的小鼠脾脏和肾脏组织进行了实验,结果显示-80℃冻存1年内的组织,复苏后各项指标依然较高,能满足单细胞测序等对组织活性有要求的相关实验。

 

 

 

测试流程:

 

 

 

 

测试结果:

 

 

 

小鼠组织冻存不同时间后解离为单细胞悬液的质检结果

 

 

项目实测

 

 

目前我们已完成大量用该组织冻存液处理的样本的单细胞测序项目,涉及的组织类型数十种!

 

 

 

部分项目实测组织冻存后数据表现

 

 

 

 

 

 

 

 

不同组织复苏后单细胞测序数据结果

 

注:数据均经对应项目的客户同意后发布

 

 

 

 

 

产品宣传页

 

 

 

点击下载:百奥益康动物组织冻存液产品宣传页(货号:BA3312)

 

 

 

产品说明书

 

 

 

点击下载:百奥益康动物组织冻存液使用说明书(货号:BA3312)

 

 

 

 

订购信息

 

 

 

 

 

 

产品名称

 

产品货号 产品规格 目录价格

 

动物组织冻存液

 

 

BA3312-100

 

100 mL ¥2,500

 

BA3312-500

 

500 mL ¥10,000

 

 

 

 

 

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产品 FAQ

 

 

1.    Q:这款冻存液适用于所有动物组织吗?对敏感组织(如神经组织、胚胎组织)的冻存效果如何?能否用于植物组织或微生物样本?


A:冻存液适用于绝大多数哺乳动物组织(如肝、肾、心脏、皮肤等),对敏感组织(神经组织、胚胎组织)也有较好适配性 —— 其含低毒性保护成分,能减少冰晶对脆弱细胞的损伤,复苏后敏感组织的细胞活性通常可达 65% 以上(普通组织活性≥80%)。但不适用于植物组织或微生物样本,植物组织的细胞壁结构、微生物的代谢机制与动物组织差异极大,冻存液成分无法满足其保护需求,可能导致复苏失败。用于敏感组织时,建议将组织切至更小尺寸(0.5mm×0.5mm×0.5mm),确保冻存液充分浸润,提升保护效果。

 


2.    Q:说明书要求冻存组织量约 200mg(黄豆粒大小),若组织量不足(如 50mg)或过多(如 300mg),会影响冻存效果吗?该如何调整操作?


A:会影响效果。组织量不足(<100mg)时,冻存液相对过量,组织易受保护成分过度作用,复苏后可能出现细胞代谢紊乱;组织量过多(>250mg)时,冻存液无法充分包裹组织内部细胞,导致局部细胞因缺乏保护而坏死,复苏后活性下降。调整方法:①量不足时,可将多份小剂量组织(每份 50-100mg)合并放入同一冻存管,按总重量计算冻存液用量(总重量 10 倍体积),避免单份组织量过少;②量过多时,分多管冻存,每管组织量控制在 150-200mg,确保每份组织都能被冻存液充分覆盖,且符合后续实验的样本用量需求。

 


3.    Q:步骤 5 要求 “冻存液体积是组织重量的 10 倍”,若组织含较多水分(如水肿组织)或脂肪(如脂肪组织),该比例是否需要调整?调整后会影响冻存效果吗?


A:需根据组织特性灵活调整比例:①水肿组织(水分含量高):冻存液体积可降至组织重量的 8 倍,避免水分与冻存液混合后稀释保护成分,导致保护效果减弱;②脂肪组织(密度低、易漂浮):冻存液体积需提升至组织重量的 12 倍,确保脂肪组织完全浸没在冻存液中,避免局部暴露在空气中导致细胞坏死。调整比例后,需在冻存管上标注组织类型及调整后的用量,后续复苏时按常规步骤操作即可,只要冻存液能充分包裹组织,不会对最终冻存效果产生显著影响。

 


4.    Q:步骤 7 要求 “用程序性冻存盒确保降温速度约 1℃/min”,若实验室没有程序性冻存盒,能否用其他方法替代?直接放入 - 80℃冰箱或液氮会有什么问题?


A:无程序性冻存盒时,可自制替代装置:将冻存管放入装有异丙醇的泡沫盒(厚度≥5cm),密封后放入 - 80℃冰箱,异丙醇能缓冲降温速度,接近 1℃/min(误差 ±0.5℃),但需确保泡沫盒无破损,避免异丙醇挥发。不可直接放入 - 80℃冰箱或液氮:直接放 - 80℃冰箱,降温速度可达 5-8℃/min,易形成大冰晶戳破细胞;直接放液氮,降温速度骤达 100℃/min 以上,组织会因瞬间低温出现 “玻璃化损伤”,复苏后几乎无活细胞,必须通过程序性降温过渡。

 


5.    Q:冻存液需 - 20℃避光保存,若融化后一次用不完,剩余冻存液该如何处理?能否再次冷冻保存?反复冻融会有什么影响?


A:融化后未用完的冻存液,需在 24 小时内 4℃避光保存,且不可再次冷冻。反复冻融会破坏冻存液中的保护成分(如 DMSO 稳定性下降、蛋白保护剂变性),导致抗冻能力骤减 —— 冻融 1 次,组织复苏活性可能下降 15%-20%;冻融 3 次以上,冻存液基本失效,无法保护组织细胞。建议收到试剂盒后,根据单次冻存需求,将 100mL 冻存液分装为 10mL / 管或 5mL / 管(用无菌冻存管),密封后 - 20℃保存,每次实验取 1 管,避免反复冻融。

 


6.    Q:步骤 2 复苏时要求 “37℃水浴锅快速摇晃融化”,“快速摇晃” 的频率和力度有什么要求?若融化不彻底或水温偏离 37℃(如 35℃、40℃),会有什么后果?


A:“快速摇晃” 要求:手持冻存管沿水平方向轻轻摇晃,频率约每秒 1-2 次,力度以管内液体轻微旋转、不产生剧烈漩涡为宜,目的是让冻存液均匀受热,加速融化。融化不彻底(仍有明显冰晶)时,冰晶会在后续加入培养基过程中骤融,产生渗透压冲击,破坏组织细胞;水温 35℃时,融化速度过慢,组织在低温环境暴露时间延长,活性会额外下降 10%-15%;水温 40℃时,高温会导致组织细胞受热应激,酶活性异常,复苏后细胞大量死亡,需严格控制水浴锅温度在 37℃±1℃。

 


7.    Q:步骤 4 要求 “冻存液一滴一滴加入温育好的培养基,一边滴加一边摇晃”,滴加速度和摇晃力度该如何把控?若快速一次性倒入,会有什么后果?


A:滴加速度控制在 “1 滴 / 2-3 秒”,摇晃力度以 “离心管内液体缓慢旋转,无明显分层” 为宜,核心是让冻存液(含 DMSO)与培养基缓慢混合,逐步降低 DMSO 浓度,避免浓度骤变引发细胞渗透压剧烈波动。不可快速一次性倒入,一次性倒入会使局部 DMSO 浓度瞬间从 10% 左右降至 2% 以下,组织细胞因渗透压骤变出现脱水或吸水膨胀,细胞膜破裂,复苏后活性可能下降 40% 以上,严重时导致组织无法用于后续实验。

 


8.    Q:离心参数要求 “4℃,300×g 离心 5 分钟”,若离心时间不足(如 3 分钟)或转速过高(如 500×g),会对复苏后的组织产生什么影响?能否用室温离心替代 4℃离心?


A:离心时间不足(<5 分钟)时,组织细胞无法充分沉淀,随上清丢弃会导致样本流失,得率降低;转速过高(>400×g)时,离心力过大会挤压组织细胞,尤其对脆弱组织(如胚胎组织),可能导致细胞破裂,活性下降 25%-30%。室温离心不可替代 4℃离心,室温会加速组织细胞代谢,且残留冻存液在室温下活性增强,可能继续损伤细胞,4℃离心能维持细胞低代谢状态,减少离心过程中的活性损失。

 


9.    Q:步骤 5 复苏后需 “加入适当组织解离液消化为单细胞悬液”,“适当组织解离液” 具体指什么?能否用本品牌其他解离试剂盒(如 BA3303、BA3305)?消化时需注意什么?


A:“适当组织解离液” 指与冻存组织类型匹配的专用解离试剂盒,例如冻存肝组织用 BA3323 肝脏组织解离试剂盒,冻存脑组织用 BA3305 小鼠脑组织解离试剂盒,冻存肿瘤组织用 BA3320 肿瘤组织解离试剂盒,可使用本品牌对应组织的解离试剂盒,其酶解参数与冻存液复苏后的组织状态适配性更佳。消化时需注意:①复苏后的组织较脆弱,解离时间需比新鲜组织缩短 20%-30%;②每 10 分钟质检一次,避免过度消化导致细胞活性下降,确保单细胞得率与活性平衡。

 


10.    Q:若冻存管在 - 80℃冰箱中保存超过 6 个月,或在运输过程中温度波动(如从 - 80℃升至 - 20℃再回落),复苏后的组织还能用于单细胞测序实验吗?


A:-80℃保存不建议超过 6 个月,超过后组织细胞活性会随时间逐渐下降(每月下降 5%-8%),6 个月后活性可能低于 50%,勉强用于单细胞测序会导致数据质量下降(如细胞捕获率低、基因表达偏差)。运输过程中温度波动(-80℃至 - 20℃)会导致组织反复经历 “微冻融”,破坏细胞结构,即使温度回落,复苏后活性也会下降 30% 以上,不建议用于单细胞测序等高精度实验,仅可用于预实验或形态学观察。长期保存建议在 - 80℃冰箱放置不超过 24 小时后,转移至液氮(-196℃),可保存 1 年以上且活性稳定。